柱效测试液一般都用什么呢

色谱柱性能评价
    通常,以指定的一组标准溶质为样品,测定它们在柱子上的理论塔板数，以作为柱效的衡量指标。这种标准溶质的选择，因不同的色谱模式而异，也因不同的使用目的而有所不同。一般情况下，要求它们具有不同的保留因子（例如，第一个化合物k=0，其余的在2～10范围内），能反映出对柱子性质的基本要求，而且能在一般的HPLC装置上得到清晰的信号。例如，对于反相填料，可以选择一组具有不同极性的芳香族化合物。这一组标准溶质可由苯、萘、菲或苯、甲苯、二甲苯等为基本组分，再添加以苯酚和苯胺等酸、碱性溶液而成。不同的厂家推荐的标准溶质往往相差很大，如有的由尿嘧啶、对位乙基苯和对位丙基苯组成。其中尿嘧啶兼顾了碱性物质；有的厂家推荐用马来酸、苯胺、二甲基苯胺、苯二甲醛和苯甲醛组成，其目的是观察它们同时分离性质差异很大的化合物的能力。对碱性物质的分离能力是填料残余硅羟基和杂质金属离子含量多少的反映。因此在试样中加入吡啶便可以很敏感地观察填料这一方面的性能。各实验室可根据自己的要求配制自己的标准溶质。也可以采用与一些著名厂家相同的标准溶质系列，以便于与之进行比较。从标准溶质系列的色谱图，使可以测定出各溶质的理论塔板数N。在测定时N的计算可按下式

N=16(tR/W)2

式中，tR为保留时间；W1/2为半峰高宽度。
    需要注意的是,新购来的柱子在实验室中所测得的柱效，往往低于生产厂家给出的柱效。排除在保存和运输中所引起的柱性能的变化等因素外，柱外效应的影响可能是主要的原因。只要将柱外效应减至最小（主要是自进样阀至柱头，以及自柱头至检测器的连接管），一般就可以得到满意的色谱图。
一、反相色谱柱评价
    对于一根预填充柱来说，最基本的柱性能评价指标是柱效和峰对称的测定。将柱子接入色谱系统时应尽可能的降低柱外体积。这里所说的柱外体积主要包插进样阀至柱并没有和柱尾至检测器的连接管路的内体积。一般最好使用内径0.1mm(或0.2mm)的不锈钢或PEEK管,长度应尽可能地短。过长的管路会使谱带的峰展宽明显地加大而降低所测柱效，如前所述，测试样品可选用一组含芳香环的化合物（例如可由苯、甲苯、萘和苯胺组成），以甲醇或乙腈配成溶液，浓度可为各含0.1mg/ml。流动相可使用乙腈或甲醇的水溶液，如50%～70%的乙腈或65%～85%的甲醇水溶液。对于通常的标准柱型，即Φ4.6mm×250mm的柱子来说，流速以1ml/min为宜。此时的淋洗线速度约为1mm/s。如欲和厂家提供的标准图相比较，则应选用与厂家相同的测试条件。可通过色谱为工作站等数据处理装置自动获取有关数据。
    对于C18以外的反相色谱柱，可视其配基相对疏水性的离低调整流动相中有机溶剂的比例。例如，随着配基碳链的缩短，流动相中乙腈的比例可降低为30%～60%。以键合相正相柱作为反相柱使用时，因配基极性较大，也须使用较低浓度的有机溶剂。

二、正相色谱柱评价
    正相色谱柱中以硅胶柱的使用较为普遍，化学键合相柱也有重要的应用。其流动相主要以戊烷、己烷、庚烷等弱极性溶剂为主，添加少量极性溶剂，如醚类、酯类、醇类等，以调节其淋洗强度。但这些溶剂和添加剂在所使用的检测波段的紫外吸收应较低，否则会影响样品的检测。正相色谱的分离对象以非极性和中、弱极性物质为主，柱评价的标准混合物一般可使用苯甲酸酯等特质。例如，使用的硝基苯、邻、间硝基苯胺和对硝基苯胺的混合物，用以评价硅胶正相色谱柱。